Patologia ultraestructural en Venezuela durante el siglo XX
Los inicios En 1933, los doctores Ernest Ruska
y Max Knoll, un físico y un ingeniero eléctrico, inventaron el microscopio
electrónico (ME), de acuerdo con lo que relató el mismo Ruska en su
autobiografía (1). Ambos comercializarían su invento en el año 1939,
lo que les valdría para que en 1986, le otorgasen a Ruska el Premio Nobel de
Física. Ambos investigadores habían logrado a través de lentes
electromagnéticas hacer con el chorro de electrones lo que las lentes de vidrio
hacían con la luz, e impregnando los tejidos con metales pesados los
observarían en una pantalla pudiendo fotografiarlos. El ME de transmisión se
perfeccionaría con los avances tecnológicos que les aportaron algunas
substancias maleables y endurecidas como el metacrilato y las resinas epoxy
capaces de penetrar en las células sin distorsionar su arquitectura interna, y
con el invento de cuchillo o bisturí de diamante de Fernández Morán se lograron
las secciones ultrafinas necesarias para poder observar con el ME estructuras
moleculares avanzando de la resolución de una micra con la luz a 50 nanómetros,
y cada vez menos con el chorro de electrones. El progreso de la Biología con
este invento fue vertiginoso y áreas como la Botánica y la Medicina se
favorecieron de inmediato. En 1968, los doctores Juan Rosai y Héctor Rodríguez,
entonces jóvenes patólogos formados bajo la tutela del profesor Lauren Ackerman
en la Universidad George Washigton de St. Louis Missouri, publicarían un
artículo en el American Journal of Clinical Pathology, con el título de
“Application of electronmicroscopy to the differential diagnosis of tumors”(2).
Desde ese entonces, se le daría la importancia al ME para utilizarlo como un
arma con poderes diagnósticos en el estudio de la patología tumoral humana.
La intención de este trabajo, es señalar como después la publicación de
Rosai y Rodríguez sobre el uso del ME para diagnosticar con mayor precisión los
tumores, las publicaciones internacionales en revistas calificadas sobre el
tema, comenzarían a aparecer cada vez con mayor frecuencia. Son innumerables y
citarlas llenaría páginas enteras. En un desconocido paralelismo, entre 1969 y
1997, la historia de dos microscopios electrónicos en nuestro país(3)
y sus repercusiones hasta la actualidad (2016), servirá para mostrar cómo,
durante más de 30 años se desarrolló la patología ultraestructural tumoral y la
investigación ultraestructural microbiológica utilizando el ME en la patria de
Fernández Morán.
Primera etapa El 19 de
abril de 1948, el doctor Pedro Iturbe después de una lucha tenaz, había logrado
inaugurar el Sanatorio Antituberculoso de Maracaibo, dedicado exclusivamente al
aislamiento y tratamiento de pacientes tuberculosos. Años más tarde, con la
aparición de nuevos tratamientos para la enfermedad el doctor Iturbe,
"Padre de la Medicina Familiar", iniciaría paulatinamente la
transformación del Sanatorio en Hospital General. En 1964 crearía una
Urbanización Sanatorio para los empleados del hospital, en 1965 la Unidad de
Nefrología y en 1968 se instalaría un microscopio electrónico como una
dependencia del Servicio de Anatomía Patológica de esa institución. El año 1975
se abrió la sala de hospitalización pediátrica, en 1976 el jardín de infancia y
en 1978, un gran auditorio para eventos científicos y culturales, hasta que en
1988, en homenaje a la inmensa labor del creador de la institución, se le dio
su nombre. Hospital General del Sur Dr. Pedro Iturbe.
El funcionamiento de un Laboratorio de Microscopía Electrónica en el
hospital Sanatorio Antituberculoso de Maracaibo, se haría efectivo en 1969. El
doctor Iturbe lograría un ME JEM7A a través de una donación y con el
asesoramiento del doctor Humberto Fernández Morán se instalaría el equipo. Los
estudios iniciales sobre la patología comenzarían con gran actividad en eventos
científicos del país y del extranjero y con sus publicaciones. En marzo de 1971
se realizó en Maracaibo el Primer Simposio Venezolano sobre Patología
Ultraestructural con invitados de Colombia, Argentina, México, Estados Unidos y
patólogos de Caracas y virólogos del IVIC, ese año 1971 se realizó también el
VIII Congreso Latinoamericano de Patología en Maracaibo, un evento donde se
presentaron numerosos trabajos sobre la patología ya examinada con el ME. Los
trabajos de investigación del Laboratorio de ME estuvieron encaminados a
examinar los epitelios de la piel y del cuello uterino (4,5,6,7)
considerando que eran la mucosa oral y el cérvix las áreas más accesibles para
tomar muestras e investigar sobre el carcinoma epidermoide, ya que el del
cérvix, era la primera causa de muerte por cáncer en la mujeres venezolanas y
así se mantuvo durante el pasado siglo XX. La identificación de partículas
virales en el exudado vaginal de pacientes y el estudio colposcópico,
histopatológico y ultraestructural de lesiones en cérvix y vagina, demostradas
por JT Nuñez Montiel y J García Tamayo, fueron presentados como trabajos libres
en el IX Congreso Latinoamericano de Patología, Mérida Yucatán México, en
octubre, 1973, y serían publicados como resúmenes del evento en la Revista de la
Sociedad Latinoamericana de Patología (8,9), trabajos estos que tras
la muerte de Nuñez Montiel, fueron publicados en Acta Médica Venezolana el año
1978 (10), demostrando la importancia del virus del papiloma humano
(VPH) en el cáncer cervical.
Paralelamente el ME de alta resolución
permitiría el estudio de otros agentes virales y de protozoarios que afectaba a
la población en el occidente del país, y llevaron a producir las primeras
publicaciones sobre la ultraestructura del virus de la encefalomielitis equina
venezolana (EEV), del virus de la rabia, y de la tricomona vaginalis (11-20).
La aplicación del ME en los estudios que se llevaban adelante en un Sanatorio
Antituberculoso transformándose en hospital general condujeron a la publicación
de trabajos experimentales y clínicos sobre el pulmón (21), sobre
los riñones (22, 23, 24) y colaborando con la Facultad de
Veterinaria de la Universidad del Zulia, sobre la ultraestructura de sangre
periférica en animales (25). Los conocimientos sobre la
ultraestructura de protozoarios inicialmente examinados en 1966 (26)
se amplió con la identificación de amibas de vida libre del género Acantamoeba (27)
y se publicarían en 1978, en la Revista Acta Cytologica (EUA) más observaciones
sobre la ultraestructura de la tricomona vaginalis (28).
Segunda etapa Entre 1978 y 1980 utilizando el ME del Instituto Anatomopatológico en la
Universidad Central de Venezuela se inició formalmente la publicación de
trabajos sobre la patología ultraestructural tumoral (29-33)
destacando el hecho de que estos primeros cinco trabajos fueron publicados el
primero en una revista venezolana vigente para la época y los otros cuatro, en
revistas de Patología en México y en España y comprendían el estudio de tumores
musculares, de células germinales, sarcomas de hueso y un tumor de la grasa
parda caracterizado por la apariencia de sus activas mitocondrias, el
Hibernoma. El ME pasó a ser además de un arma diagnóstica, un instrumento de
enseñanza para los residentes del postgrado de Anatomía Patológica en la
Universidad Central de Venezuela, Se hizo común utilizar el llamado
“retrospectoscopio” para señalar como se podía ir de las láminas coloreadas con
hematoxilina y eosina a descubrir con el ME los filamentos, microvellosidades,
gránulos, luces y densidades en las células tumorales que la ultraestructura
trasformaba en estructuras precisas valederas para asegurar los diagnósticos.
En esos años los estudios sobre el virus encefalítico habían progresado
gracias al apoyo del Departamento de Virología de IVIC y en trabajos
experimentales demostramos aspectos sobre la respuesta inmune y la
ultraestructura del sistema nervioso central (SNC) en el fenómeno encefalítico
experimental inducido por el virus de la EEV (34,35). Las
investigaciones estaban dirigidas hacia la búsqueda de un modelo experimental
para demostrar el daño intrauterino provocado por el virus y este saldría
adelante cuando se logró que las ratas sobrevivieran a la inoculación con la
cepa Guajira; un trabajo realizado gracias a Carreño y Esparza, que mostró los
resultados de la ultraestructura del SNC en las ratas sobrevivientes y se
publicaría en una revista de Gran Bretaña en 1979 (36). De esta
manera, el modelo experimental propuesto para investigar el daño intrauterina,
fue aceptado y publicado en el Boletín de Patología Comparada del Instituto de
Patología de las Fuerzas Armadas de EUA (37) y ya en 1981
comenzaríamos a publicar en Infection & Immunity (EUA) información sobre
las lesiones tempranas de fetos y placentas observadas en las ratas Sprague
Dawly utilizando también la inmunohistoquímica (38,39). Igualmente
se examinó la activación de la toxoplasmosis cerebral en ratas (40)
y publicamos en Acta Médica Venezolana el estudio ultraestructural de casos de
amibiasis cerebral y de encefalitis granulomatosa amibiana (41). En 1981, un par de trabajos con el ME
marcarían un hito de relevancia; uno de ellos el estudio experimental en
bovinos sobre la ultraestructura del tejido nervioso de la médula espinal de
animales afectados por rabia paralítica, señalando detalles sobre la
alteraciones de las neuronas ante la acción del virus de la rabia (42);
el otro trabajo, menos experimental demostraría con el ME de Transmisión y el
ME de Barrido el poder de penetración de las pseudohifas de Candida Sp y
la división intracelular de las esporas en las células del epitelio vaginal(43). Durante los años 1982-1984 se publicó un estudio sobre la ultraestructura de 15
timomas y se examinaron los detalles ultraestructurales de los tumores malignos
de células redondas, el tumor odontogénico epitelial calcificado, el tumor de
células gigante maligno de los tejidos blandos, y las pápulas perladas del pene
(44-48). Entre 1983 y 1989 se publicaron nuevamente trabajos sobre
el VPH y sus efectos en la neoplasia epitelial vulvar(49), se revisó
nuevamente la ultraestructura del VPH y el cáncer ginecológico(50) y
en ActaCytologica (EUA) se describieron ciertos cambios ultraestructurales
presentes en las células descamadas durante la infección con VPH (51).
El año, 1986 se publicaría un trabajo experimental importante sobre el efecto
del virus de la EEV utilizando la cepa TC83, menos virulenta que la Guajira por
ser la usada para la vacuna (52). En 1988 y 1989 se publicarían dos
importantes trabajos sobre tumores cuya morfología no estaba clara y en los que
la ultraestructura ayudaría a dilucidar su origen; la fasciitis
pseudosarcomatosa que resultaba ser una lesión de miofibroblastos y el
hemangioendotelioma epitelioide, una lesión descrita por Sharon Weiss y
Enzinger que simulaba ser una neoplasia epitelial(53,54). Estábamos
ya viviendo la pandemia del SIDA y comenzaríamos a publicar nuestra experiencia
con la ayuda del ME en las autopsias y las biopsias de estos enfermos;
inicialmente sobre 50 autopsias(55) y
luego señalando la importancia que la inmunohistoquímica estaba aportando a los
estudios ultraestructurales(56), para describir casos de Herpes, y
cuando ya teníamos 404 autopsias de SIDA examinadas sobre las infecciones
micóticas oportunistas y sobre 69 biopsias hepáticas y la patología pulmonar en
el SIDA(57-60). En 1962 se publicó un estudio clínico, histológico y
ultraestructural sobre la anemia drepanocitica y las lesiones hepáticas en esta
patología, y 34 casos de tumores pediátricos epiteliales y mesenquimáticos, e
igualmente se examinaron 17 casos de rabdomiosarcomas con el ME(61-63).
Tras reportar un nuevo caso de encefalitis granulomatosa amibiana en una
revista alemana(64) publicaríamos un estudio sobre el aporte del ME
en las biopsias endomiocárdicas en particular en la cardiomiopatía dilatada (65)
y posteriormente en 1997 sobre la ultraestructura pulmonar en la proteinosis
alveolar(66). Finalmente tuvimos la oportunidad de examinar con el
ME muestras de cultivos celulares de humanos infectados con el virus de la EEV
en otra epidemia de encefalitis acaecida en el Zulia en 1995(67).
Los costos de los estudios con el ME se habían hecho muy elevados, y la
inmunohistoquímica había venido a resolver casi todos los problemas de
diagnóstico para los cuales antes dependíamos del ME. En 1997 me tocó en lo
personal tener que sepárame de mi trabajo en la Sección de microscopía
electrónica del Instituto Anatomopatólogico de la Facultad de Medicina en la
Universidad Central de Venezuela. Me hubiese gustado que las numerosas personas
que trabajaron en estas lides y se involucraron en los estudios
ultraestructurales de nuestra patología pudiesen ser coautoras de este trabajo,
no puede ser posible, pero estarán presentes en las referencias bibliográficas
y guardaré siempre un recuerdo muy especial para el personal técnico y para los
entusiastas médicos residentes que durante sus años de preparación para hacerse
patólogos intervinieron en tantos casos, aprendiendo y enseñándonos a todos.
Sin embargo, sin que por ser los últimos dejen de ser importantes, debo
terminar de referirme a otras publicaciones que seguirían naciendo del estudio
ultraestructural de los tumores, ya acompañados usualmente de la correlación
inmunohistológica. De esta manera, ese mismo año 1997 publicamos un detallado
trabajo en Investigación Clinica (Ven) con el título de : Aplicación de la
Microscopía Electrónica de Transmisión y la inmunohistoquímica al diagnóstico
de los tumores malignos(68), para así iniciar una serie de
publicaciones sobre tumores con los resultados del estudio ultraestructural e
inmunohistoquímico(69), sobre el tumor murino transplantable(70),
el fibosarcoma congénito(71) Glioblastoma Multiforme congénito(72),
el tumor de Askin(73), la Nesidioblastosis(74) el estudio
ultraestructural del Pneumocistis carinii (75) y de la
aplicación del ME al estudio de la patología microbiológica del SIDA (76).
En el año 2001 David Mota y colaboradores publicarían sobre la ultraestructura
e inmunohistoquímica del carcinoma medular de tiroides (77). Para concluir, debo
señalar que en la Revista Vitae Academia Biomédica Digital, de la Facultad de
Medicina, de la Universidad Central de Venezuela pudimos seguir publicando una
larga serie de trabajos sobre la inmunohistoquímica (IHQ) de los tumores. Estas
publicaciones no corresponden a trabajos directamente hechos con el ME,
exceptuando uno de ellos, el de José Rafael Tovar, Eduardo Caleiras y mi
persona sobre la ultraestructura del virus del Dengue en humanos, único trabajo
con este tipo de material utilizando en ME(78). Sin embargo, algunas
de las publicaciones en VITAE Academia Biomédica Digital, pueden servir de
ayuda al examinar el diagnóstico diferencial de los tumores bajo los criterios
que ofrece la IHQ, ya que para corroborar los diagnósticos, habrá que aplicar
en cada caso, cuanto habíamos aprendido sobre la ultraestructura de las
neoplasias. En este sentido añadiremos las referencias (79-89).
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Maracaibo, 9 de febrero de 2017
Artículo publicado hoy 09/02/2017 en Academia
Biomédica Digital VITAE
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